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日立超速离心机售后维修,超速密度梯度离心法

日立应用 2024-06-22 06:15:55

超速密度梯度离心是一种离心分离技术，它基于样品中不同成分的密度差异，利用制备的稠密的介质溶液在离心管内形成连续或不连续的密度梯度。当样品在高速旋转的离心机中受到离心力作用时，不同密度的成分会沉降到不同位置，从而实现分离。

在超速密度梯度离心中，常用的介质包括氯化铯、蔗糖和多聚蔗糖等。这些介质的主要作用是形成密度梯度，并通过防止液体介质对流混合来确保分离后的各区带不会损坏。

要实现超速密度梯度离心，超速离心机是必不可少的。Eppendorf 目前提供落地款 CP-NX 系列超速离心机和 CS(F)NX 微型超速离心机，均可用于实现高效的密度梯度离心实验，助力优质产物纯化。

超速密度梯度离心法可分为“速率区带离心法”和“等密度梯度离心法”两种。

速率区带离心是指颗粒在离心力的作用下，以不同的速度向管底沉降，最终形成区带的方法，其分离的方法学原理主要基于样本和杂质之间的大小和形状差异；等密度梯度离心法则是利用离心力和浮力达到平衡的原理，使颗粒在与其密度相等的介质中达到等密度区带，其依据的分离方法学原理是样本和杂质之间密度的差异。

比如大家所熟知的“DNA半保留复制”，便是通过等密度梯度离心法被发现的。

1958年，美国科学家Matthew Meselson和Franklin Stahl进行了一项关键性的实验。首先，他们利用含15N的NH4Cl作为唯一碳源的培养基来培养大肠埃希菌，使其DNA分子中富含15N同位素。经过连续培养若干代后，大肠埃希菌的DNA就被充分标记了15N。
然后，科学家们将这些标记了15N的大肠埃希菌转移到普通培养基（含14N氮源）中继续培养。在复制过程中，新合成的DNA链会包含14N，而原始链则保留15N。
培养完毕进行等密度梯度离心，由于不同密度的DNA分子被同位素进行了标记，因此会根据其密度的差异在梯度介质中沉降到不同的位置。

由于DNA半保留复制的特性，新合成的DNA分子会包含一条原始链和一条新合成的链，

因此，子一代的DNA分子将是一条15N链和一条14N链的杂合分子，密度介于纯15N-DNA和纯14N-DNA之间。