当我们需要对一些病毒颗粒(病毒载体、病毒性疫苗)进行分离纯化的时候,超速密度梯度离心是其中一种选择。通常会使用不同的密度介质液(蔗糖,氯化铯CsCl), 形成密度梯度,超速离心过程中,样品根据各自的密度差异或者沉降速度差异,移动到梯度中不同位置而形成区带,使得不同颗粒得以分离。
了解更多超速密度梯度离心知识:
常规超速离心机的转子一般分为水平转子,角转子,垂直转子和近垂直转子。在病毒颗粒分离中,由于转速要求一般较高,往往这些常规转子的总液体处理量有一些局限性(通常≤500 mL), 考虑到密度梯度液的体积,往往样品的处理通量可能会更小(≤200 mL)。
Eppendorf 超速离心机中其实还有一种处理通量相对较大的选择:区带转子 P32ZT。 该转子拥有1.69 L处理通量,腔室被从十字隔板划分为四个扇形区室, 阻止溶液在离心池中旋转,叶片上有径向导管,溶液通过导管从中心流向转子体外壁。
左:区带转子P32ZT 右:区带转子P32ZT腔室内部
区带转子跟常规转子不同的是,区带转子上样和卸样过程,一般是在2000 rpm – 3000 rpm 运转中进行的。在上样过程中,首先将较轻的密度梯度液通过密封组件泵入到转子内,密度梯度液会在转子外壁的垂直方向形成均匀的一层,然后一次加入密度逐渐递增的密度梯度液,在转子中逐步形成一个类线性的密度梯度溶液。带密度梯度液泵入结束后,再将所需分离的样品通过密封组件泵入到转子中。
样品上样结束后,会将密封组件移除,然后盖上转子盖,关闭离心腔门。离心机加速到设定转速后进行分离。目标样品和杂质会进入到不同的区带中,从而实现分离。
离心完毕后,卸样过程中,需要将转速降至2000 rpm – 3000 rpm, 然后安装上密封组件
通过泵入较重的密度梯度液,使得转子体内的液体从轻到重依次被挤出。通过收集不同的样品,将样品进行检测后,确认目标样品所在的区带。
综上所述,P32ZT 区带转子非常适合高 RCF 的长时间密度梯度离心,用于批次处理,广泛应用于病毒分离、疫苗生产等。
日立离心机售后维修,日立离心机官网